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核酸探针技术

作者 Admin 浏览 发布时间 14/02/18 点击评论

核酸探针技术
  核酸探针是指带有标记物的已知序列的核酸片段,它能与其互补的核酸序列杂交形成双链,所以可用于待测核酸样品中特定基因序列的检测。每一种病原体都具有独特的核酸片段,通过分离和标记这些片段就可制备出探针,用于检测任何特定病原微生物,并能鉴别出密切相关的毒(菌)株和寄生虫。
  核酸杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。固相杂交技术较为常用,先将待测核酸结合到一定的固相支持物上,再与液相中的标记探针进行杂交。固相支持物常用硝酸纤维素膜(N i trocel-lulosefi ltermembrane,简称NC膜)或尼龙膜(Nylonmembrane )。
  固相杂交包括膜上印迹杂交和原位杂交。其中膜上印迹杂交技术应用最为广泛,它包括3个基本过程首先是通过斑点印迹(dot-blot)或southern印迹(southemblot)的核酸印迹技术将核酸片段转移到固相支持物上,然后用标记探针与支持物上的核酸片段进行杂交,最后进行杂交信号的检测。



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